Homocysteine: validation and comparison of two methods using samples from patients with pulmonary hypertension / Homocisteína: validação e comparação entre dois métodos utilizando amostras de pacientes com hipertensão pulmonar

Introduction and objective: The determination of homocysteine plasma levels has been reported as a risk marker of interest in severe diseases involving endothelial injury and associated with the development or progression of atherosclerotic lesions and thrombus formation. The aims of this study were to validate method for quantification of plasma homocysteine by high performance liquid chromatography (HPLC) with fluorimetric detection, and to compare the results obtained from patients with pulmonary hypertension by HPLC with those obtained by spectrophotometric enzymatic cycling (S-Ec) method. Materials and methods: The validation parameters, such as linearity, matrix effect, precision, accuracy, detection and quantitation limits, and robustness of the method were evaluated aiming to demonstrate that it is suitable for the intended use. The data obtained in the quantification of homocysteine using the validated method (HPLC) and the spectrophotometric enzymatic cycling (S-Ec) method, were compared. Results: The method was precise, accurate, and robust; it also had good recovery and showed no matrix effect. The linearity covered a range of 5.0-85.0 µmol/l and the limits of detection and quantification were 1.0 µmol/l and 3.4 µmol/l, respectively. The results obtained for homocysteine determination by HPLC and S-Ec methods were comparable. Conclusion: The validated HPLC method showed good performance for quantification of plasma homocysteine levels, while S-Ec method provided results for homocysteine comparable with those obtained by the validated method; therefore, this methodology is a potential alternative of automated method for clinical laboratories. .

Introdução e objetivo: A determinação dos níveis plasmáticos de homocisteína tem sido relatada como um marcador de risco de interesse em doenças graves que cursam com lesões endoteliais, estando associada ao desenvolvimento ou à progressão de lesões ateroscleróticas e formação de trombos. Os objetivos do presente estudo compreenderam validar o método de dosagem de homocisteína plasmática por cromatografia líquida de alta eficiência (CLAE) com detecção fluorimétrica, analisar amostras de pacientes com hipertensão pulmonar e comparar os resultados obtidos por CLAE com aqueles obtidos com a metodologia espectrofotométrica enzimática cíclica (E-Ec). Materiais e métodos: Os parâmetros de validação linearidade, efeito de matriz, precisão, exatidão, limites de detecção e quantificação, além de robustez do método foram avaliados visando demonstrar que este está apropriado para o uso pretendido. Os dados obtidos na quantificação de homocisteína pelo método validado (CLAE) e pela metodologia espectrofotométrica enzimática cíclica (kit da Labtest) foram comparados. Resultados: O método mostrou-se preciso, exato, robusto, com boa recuperação e não apresentou efeito de matriz. A linearidade abrangeu a faixa de 5 a 85 µmol/l, e os limites de detecção e quantificação foram 1 µmol/l e 3,4 µmol/l, respectivamente. Quanto à comparação dos resultados da determinação de homocisteína por CLAE e por E-Ec, eles foram comparáveis. Conclusão: O método validado por CLAE apresentou desempenho adequado para mensuração dos níveis plasmáticos de homocisteína, enquanto o uso da metodologia E-Ec forneceu resultados para homocisteína comparáveis com aqueles obtidos pelo método validado, sendo esta metodologia uma opção de método automatizado para laboratórios clínicos. .

Adiposidade e perfil metabólico em crianças de escolas da zona urbana de Ouro Preto-MG / Adiposity and metabolic profile of schoolchildren in the urban areas of Ouro Preto, Minas Gerais

A obesidade, doença multifatorial definida como excesso de gordura corporal, apresenta concomitância entre fatores de risco genéticos e ambientais. O diagnóstico precoce e as intervenções no período crítico do desenvolvimento da obesidade - infância e adolescência - têm sido recomendados, buscando-se evitar desfechos desfavoráveis na idade adulta. Este estudo transversal teve como objetivo caracterizar perfil lipídico, glicemia, adiponectina, leptina e grelina de escolares entre seis e nove anos, portadores de sobrepeso e obesidade, do município de Ouro Preto-MG. Os dados foram analisados a partir do teste de normalidade Shapiro Wilk; e nas comparações entre os grupos foi aplicado o teste paramétrico (Teste t) ou não paramétrico (Teste Mann Whitney), adotando-se intervalo de confiança de 95% e nível de significância para valores ≤ 0,05. A idade média da população escolar foi de 7,8 ± 1,1 anos, com prevalência de 8,9% de sobrepeso e 3% de obesidade. Foram identificados hipercolesterolemia em 5,5%, HDL alterado em 98,7%, taxa limítrofe de LDL em 32,4% e glicemia alterada em 46,6% das crianças. Na análise estratificada quanto ao gênero, foram observados valores maisaltos para leptina em meninas (p=0,032) e grelina nos meninos (p=0,033), não havendo diferença para as demais variáveis. Os resultados demonstram ser o excesso de peso entre escolares problema de saúde relevante no município, ressaltando-se a importância de implementação de programa de intervenção precoce por parte dos gestores. Elucidar os precursores da obesidade na infância pode levar a intervenções capazes de atenuar ou impedir suas consequências na juventude e fase adulta.

Obesity, defined as an excess in body fat, is a multifactorial disease involving both genetic and environmental risk factors. Early diagnosis and interventions during critical periods of development of obesity - childhood and adolescence - have been recommended, aiming at preventing unfavorable outcomes at a later age. This cross-sectional study sought tocharacterize the lipid profile, glucose, adiponectin, leptin and ghrelin in schoolchildren between six and nine years of age with overweight and obesity in the city of Ouro Preto (MG). The data was analyzed with the Shapiro Wilk normality test, groups comparisons were made with either a parametric (T test) or a nonparametric (Mann Whitney) test, adopting confidence intervals of 95% and a significance level of ≤ 0.05. The average age of the school population was 7.8 ± 1.1 years, with a prevalence of 8.9% of overweight and 3% of obesity. Hypercholesterolemia was found in 5.5%, HDL was abnormal in 98.7%, LDL levels were borderline in 32.4% and altered glucose levels were present in 46.6% of the children. In stratified analysis by gender, higher values of leptin in girls (p = 0.032) and ghrelin in boys (p = 0.033) were found, with no difference for the other variables. The results show that overweight/obesity among schoolchildren should be considered a significant health problem in this population, highlighting the importanceof implementing early intervention programs. Uncovering the precursors of childhood obesity could lead to interventions so as to prevent or mitigate its consequences in youth and adulthood.